Использование циклоферона в терапии больных с реактивацией Эпштейна-Барр вирусной инфекции, протекающей в форме мононуклеоза

Опубликовано в журнале:
Экспериментальная и клиническая фармакология 2017 Том 80 №11 С. 65-

Е. Б. Касымова¹, О. А. Башкина¹, Х. М. Галимзянов¹, А. Л. Коваленко^2
1 ГБОУ ВПО “Астраханский государственный медицинский университет”, Россия, 414000, Астрахань, ул. Бакинская, 121.
² ФМБА ФГБУН “Институт токсикологии Федерального медико-биологического агентства”, Россия, 192019, Санкт-Петербург, ул. Бехтерева, д. 1.

Дана оценка эффективности применения циклоферона у больных от 4 до 15 лет с реактивацией Эпштейна – Барр вирусной инфекции, протекающей в форме мононуклеоза среднетяжелой формы. Методом случайно-выборочного распределения обследуемых разделили на 2 сопоставимые группы. Группы были репрезентативны по полу, возрасту, срокам поступления в стационар, проводимой базисной терапии. Пациенты контрольной группы получали терапию по общепринятой схеме (жаропонижающие и десенсибилизирующие препараты, местные антисептические средства для обработки рото- и носоглотки), основной группы – помимо базисной терапии получали циклоферон внутримышечно из расчета 10 мг/кг массы тела на 1 введение по схеме: 1, 2, 4, 6, 8, 11, 14, 17, 20, 23 сут. Эффективность терапии оценивали по срокам уменьшения симптомов интоксикации, купирования клинических проявлений болезни и нормализации лабораторных данных, включающих, помимо общепринятых, исследования уровня α-интерферона и малонового диальдегида в крови пациентов до и после лечения. Показано, что использование циклоферона в составе комплексной терапии способствует более быстрому купированию основных клинико-гематологических симптомов заболевания, нормализации некоторых параметров иммунной системы, уменьшению выраженности эндогенной интоксикации и, как следствие, сокращению сроков пребывания больных в стационаре в среднем на 4,6 дня, р <0,05. Ни в одном случае использования препарата циклоферон не зарегистрировано побочных отрицательных реакций. Ключевые слова: Эпштейна-Барр вирусный мононуклеоз; реактивация инфекции; дети; циклоферон.

Введение

Вопросы лечения Эпштейна-Барр вирусной инфекции (ЭБВИ) на протяжении нескольких десятилетий вызывают непреходящий интерес и крайнюю обеспокоенность в связи с тем, что вирусом инфицировано более 95 % здорового населения, при этом возбудитель пожизненно сохраняется в организме переболевшего, и является триггером различных заболеваний [2].

Как известно, течение и прогноз всех герпетических инфекций в большей степени определяется функцией иммунной системы. Многими вирусами в процессе эволюции выработаны механизмы, способствующие их выживанию за счет модификации эффективности иммунного ответа хозяина (молекулярная мимикрия, подавление с помощью различных механизмов IFN-системы, кодирование синтеза гомологичных цитокинов и рецепторов и др.). Вирус Эпштейна-Барр в этом плане занимает ведущее место среди других герпесвирусов. Выявлено наличие внушительного списка гомологичных ДНК и РНК последовательностей (более 150 позиций) человека и ЭБВИ, свидетельствующих о длительной совместной эволюции популяций данного патогена и человека-хозяина. Гомологии с геномом человека обнаружены и у некоторых других вирусов (ВПГ-1, ВПГ-2, ЦМВ), однако у ЭБВИ их во много раз больше и касаются они наиболее важных высокоактивных генов [3]. Особенности иммунопатогенеза ЭБВИ способствуют его длительной персистенции в организме человека в исходе первичного инфицирования, как в форме латентной, так и хронической и медленной инфекции [1, 5], в связи с этим поиск адекватных методов лечения, не только первичной ЭБВИ, но и других ее форм, является перспективным направлением в решении вопросов борьбы с социально значимыми заболеваниями, к которым относятся герпесвирусные инфекции.

При разработке патогенетически обоснованных подходов к лечению реактивации ЭБВИ, протекающей в форме мононуклеоза, привлекла возможность использования иммуноактивного препарата циклоферон (ООО “НТФФ “ПОЛИСАН”, Санкт-Петербург). Очевидно, что если есть возможность влиять на этиологический фактор заболевания, вероятность благоприятного исхода повышается [4].

Циклоферон – современный иммуноактивный препарат, который относится к гетероароматическим соединениям класса акридионов, обладающий интерферон-индуцирующими свойствами. В экспериментальных условиях и клинических исследованиях установлена способность циклоферона регулировать антителообразование, естественную киллерную активность Т-лимфоцитов и стимулировать фагоцитоз, что сочетается с выраженным противовоспалительным эффектом препарата [6]. Иммуномодулирующий эффект циклоферона проявляется в коррекции иммунного статуса организма при иммунодефицитных состояниях различного генеза, при этом в зависимости от типа нарушений имеет место активация тех или иных звеньев иммунной системы [1, 4, 6].

Проведенный обзор отечественных публикаций, посвященных исследованию эффективности циклоферона, показывает значительное расширение сфер применения препарата [4, 6].

Цель исследования – провести оценку эффективности комплексной терапии больных с реактивацией ЭБВИ, протекающей с формированием клиники мононуклеоза, с использованием индуктора эндогенного интерферона циклоферона.

Методы исследования

В исследование были включены 70 больных в возрасте от 4 до 15 лет с реактивацией ЭБВИ, протекающей с клиникой мононуклеоза среднетяжелой формы. Для верификации диагноза применяли клинические, серологические и молекулярные методы диагностики. Реактивация инфекции устанавливалась при наличии IgM к вирусному корпускулярному антигену (VCA), диагностических титров IgG (оптическая плотность более 0,5) к ядерному антигену (EBNA) и положительных результатов ПЦР крови/слюны на ДНК-ЭБВ. Методом случайной выборки пациенты были рандомизированы на 2 группы. Группы были репрезентативны по полу, возрасту, срокам поступления в стационар. Пациенты основной группы (35 человек), помимо базисной терапии (жаропонижающие и десенсибилизирующие препараты, местные антисептические средства для обработки рото- и носоглотки), получали индуктор интерферона (циклоферон) в виде внутримышечных инъекций в дозе 10 мг/кг на 1 введение по схеме: в 1, 2, 4, 6, 8, 11, 14, 17, 20, 23 сут. Пациенты контрольной группы (35 человек) получали только базисную терапию.

Эффективность терапии оценивали по срокам уменьшения симптомов интоксикации, купирования клинических проявлений болезни и нормализации лабораторных данных, включающих, помимо общепринятых (АЛТ, ACT, билирубин), исследования некоторых иммунных (α-интерферона) и биохимических показателей (малонового диальдегида) в крови до и после лечения.

Уровни α-интерферона в сыворотке крови устанавливали методом иммуноферментного анализа (Вектор-Бест, Новосибирск) 3-кратно: в день поступления, на 5 и 10 сут от момента госпитализации.

При определении уровня в плазме крови малонового диальдегида использовали метод Jagi K. в модификации Д. И. Кузьменко и Б. И. Лаптева (1999) при длине волны 535 нм (ТБК Агат, Москва).

При проведении исследования были учтены все законодательные и этические требования. Статистическую обработку полученных данных проводили на персональном компьютере Pentium III с помощью пакета прикладных программ MicrosoftExel 2000, StatSoftStatistica 6,0 с использованием параметрических (t-тест) и непараметрических (критерий Манна-Уитни) методов вариационной статистики. Критический уровень значимости исследуемых статистических критериев принимался равным 0,05.

Результаты и их обсуждение

Анализ клинических данных выявил у всех обследованных пациентов типичное течение заболевания, характеризующееся лихорадкой, умеренным лимфопролиферативным синдромом, гепатоспленомегалией и появлением в крови атипичных мононуклеаров.

Оценка клинического течения у больных с реактивацией ЭБВИ выявила зависимость продолжительности основных проявлений заболевания от варианта проводимой терапии (табл. 1).

Таблица 1. Длительность клинических симптомов у больных с реактивацией ЭБВИ в зависимости от схемы терапии (М±т)

Достоверность различий между группами сравнения при: * р <0,05; ** р <0,001.

У пациентов, получивших в схеме лечения циклоферон, достоверно короче были сроки проявлений ангины на 29 % (2,7±0,34) дней в основной группе против (3,8±0,36) дней в контрольной, (р <0,05), увеличения и болезненности периферических лимфатических узлов – на 38 % (8,3±0,64) дней в основной против (13,4±0,47) дней в контрольной, (р <0,01), причем размеры лимфоузлов нормализовались до выписки у пациентов основной группы, в то время как в контрольной группе даже при выписке из стационара узлы остались увеличенными. Гепатомегалия купировалась быстрее на 42 %: (7,2±0,82) дня – в основной и (12,4±0,78) дня – в контрольной группе (р <0,01). Температурная реакция у пациентов, получавших циклоферон, купировалась на 40 % быстрее: до 3 дня от начала лечения, тогда как у больных контрольной группы температура нормализовалась лишь на 5 сут наблюдения.

Анализ исследования гемограммы (табл. 2) выявил сопоставимый по значениям лейкоцитоз у детей обеих групп. После проведенного лечения у пациентов основной группы отмечено достоверное снижение уровня лейкоцитов на 51,6% – с (14,9±0,4) · 10⁹/л до (7,4±0,2) · 10⁹/л (р <0,05), в то время как в контрольной группе снижение было менее значительно – на 28,7 % (с (13,2±0,4) · 10⁹/л до (9,4±0,4) · 10⁹/л, соответственно.

Таблица 2. Динамика показателей гемограммы у больных с реактивацией ЭБВИ в зависимости от схемы лечения (М±т)

* Достоверность отличий до и после лечения р <0,05;
** достоверность отличий до и после лечения р <0,01;
*** достоверность отличий между группами р < 0,001.

У детей основной группы быстрее на 35 %, чем у детей контрольной группы, снижалось количество атипичных мононуклеаров в крови – (6,5±0,6) % против (9,5±0,6) % (р <0,001) и на 34,3 % СОЭ – (6,7±0,8) против (10,2±0,6) (р <0,05).

Анализ биохимических показателей крови (табл. 3) выявил, что до начала лечения уровень общего билирубина в крови детей обеих групп был практически одинаков, на фоне проводимой терапии показатель снижался (р <0,001), но у пациентов основной группы значительней, чем в контрольной, – на 69,8 и 56 % соответственно (р <0,001). Показатель тимоловой пробы до начала лечения у всех пациентов был повышен, после лечения у пациентов основной группы он снизился на 50,7 % и нормализовался, в то время как в контрольной снизился только на 25 % и остался выше нормального уровня (р <0,001).

Таблица 3. Динамика биохимических показателей плазмы крови больных с реактивацией ЭБВИ в зависимости от схемы лечения (М±т)

* Достоверность отличий до и после лечения р <0,001;
** достоверность отличий между группами р <0,001.

Положительная динамика в ходе лечения выявлена со стороны трансаминаз: до лечения активность АлТ и АсТ у пациентов обеих групп была повышена, что объясняется вовлечением печени в патологический процесс при ЭБВИ. К моменту выписки у всех пациентов показатели снизились и достигли референсных значений, однако динамика изменений в основной группе была более выраженной: показатели АлТ и АсТ снизились на 53,3 и 60,7 % соответственно, в то время как в контрольной группе – на 25,8 и 41,9 % соответственно (р <0,05).

Определение альфа-интерферона (α-ИФН) проводили 3-кратно: в день поступления, на 5 и 10 сут терапии. Среднее содержание α-ИФН у здоровых детей составило (1,38±0,4) пг/мл. Установлено, что уровни α-ИФН в сыворотке крови у больных обеих групп до лечения колебались от 2,6 до 219,7 пг/мл, при этом средний показатель не имел достоверных различий между группами, составляя (35,2±6,4) и (34,7±5,9) пг/мл соответственно (р >0,05).

Через 5 дней от начала терапии он увеличивался у всех детей, однако максимальные значения были зарегистрированы у пациентов, получавших циклоферон, (86,4±6,4) против (45,2±4,9) пг/мл, р <0,05. Далее уровни α-ИФН снижались в основной группе и продолжали нарастать в контрольной – (42,2±2,6) против (68,4±3,7) пг/мл, р <0,05. Более высокие концентрации α-ИФН после 5-дневного курса терапии свидетельствовали об активации системы иммунитета на фоне применения циклоферона, а его снижение к 10 дню пребывания указывало на окончание периода заболевания. Высокие уровни α-ИФН, установленные на 10 день наблюдения в контрольной группе, имели прямую достоверную корреляцию с большей длительностью инфекционного мононуклеоза, не получавших циклоферон (см. рисунок).

Уровни α-ИФН в сыворотке крови больных с реактивацией ЭБВИ, пг/мл

Помимо анализа изменений клинико-лабораторных показателей, у части детей (30 человек) проведено исследование влияния иммунокорригирующей терапии на некоторые параметры, характеризующие эндогенную интоксикацию (малоновый диальдегид, МДА). Полученные данные свидетельствовали о положительном влиянии циклоферона на динамику уровня МДА на этапе его непосредственного использования (табл. 4). После лечения в основной группе отмечена нормализация уровня МДА, в то время как в контрольной группе снижение, хотя и существенным, но на 80 % выше референсных значений – (3,67±0,41) против (0,73±0,072) мкмоль/л соответственно (р <0,001).

Таблица 4. Изменение уровня МДА в крови у детей с реактивацией ЭБВИ в динамике заболевания в зависимости от вида терапии (мкмоль/л, М±т)

Достоверность различий до и после лечения, между группами, по сравнению с контрольной группой р <0,001.

Использование циклоферона, вследствие положительного влияния на динамику основных клинико-лабораторных параметров, отразилось на сроках пребывания пациентов с реактивацией ЭБВИ в стационаре (табл. 5). Как видно из представленных данных, сокращение количества койко-дней у пациентов основной группы составило в среднем 4,59, что подчеркивает целесообразность его применения в составе комплексной терапии эпизодов реактивации ЭБВИ, протекающих с развитием клиники мононуклеоза.

Таблица 5. Продолжительность пребывания в стационаре больных с реактивацией ЭБВИ в зависимости от схемы лечения

* Достоверность различий между группами сравнения при р <0,05.
* р ≤0,05, отличия между группами.

Таким образом, включение циклоферона в схему терапии реактивации ЭБВИ у детей патогенетически обосновано и сопровождается отчетливым терапевтическим эффектом. При этом не только улучшаются клинические показатели, но и восстанавливается иммунный гомеостаз, снижается уровень эндогенной интоксикации, сокращаются сроки госпитализации. Необходимо отметить, что на введение циклоферона не отмечено ни одного случая побочных эффектов, все пациенты получили лечение в полном объеме.

Полученные клинико-лабораторные данные эффективности циклоферона в сочетании с его безопасностью позволяют рекомендовать включение препарата в схемы лечения у детей с реактивацией ЭБВИ, протекающей в форме мононуклеоза.

Вывод

Введение циклоферона в состав комплексной терапии детей с реактивацией ЭБВИ, протекающей в форме мононуклеоза, патогенетически обосновано, способствует более быстрому регрессу основных клинико-гематологических симптомов заболевания, снижению выраженности эндогенной интоксикации, нормализации некоторых иммунных параметров и сокращению сроков госпитализации в среднем на 4,6 дней, р <0,05.

Работа выполнена в рамках реализации гранта Президента Российской Федерации по государственной поддержке молодых ученых-кандидатов наук за проект “Алгоритмы прогнозирования течения и персонализированной фармакотерапии хронических герпесвирусных инфекций в педиатрической практике” МК-7065.2016.7. Сроки выполнения 2016 – 2017 гг.

Литература

1. Ф. И. Ершов, Н. П. Чижов, Клин. фармакол. и тер., №4, 75-78 (1995).
2. А. П. Кудин, Медицинские новости, 1(8), 25 – 31(2006).
3. Р. А. Купчинский, Ж. эвол. биохим.и физиол., № 1, 158 – 160 (1994).
4. Применение Циклоферона в педиатрической практике, М. Г. Романцов (ред.), Санкт-Петербург (2005).
5. И. С. Марков, Мед. новости, 1(4), 54 – 57 (2010).
6. Педиатрия, Берман Р. Е. (ред.) (1991).
7. Циклоферон в клинической практике, Исаков В. А. (ред.), Санкт-Петербург (2002).

Use of interferon inductors in therapy patients with Esthtein-Barr reactivation of viral infection arising in the form of mononucleosis

E. B. Kasymova¹, O. A. Bashkina¹, Kh. M. Galimzyanov¹, A. L. Kovalenko^2
1 Astrakhan State Medical University, ul. Bakinskaya 121, Astrakhan, 414000 Russia
² Institute of Toxicology, Federal Medico-Biological Agency, ul. Bekhtereva 1, St. Petersburg, 192019 Russia

The work evaluates the effectiveness of cycloferon in patients 4 to 15 years with the reactivation of Epstein-Barr virus infection, which takes the form of a mononucleosis of a moderate form. The method of randomly-random distribution of the subjects was divided into two comparable groups. The groups were representative by sex, age, hospital admission, baseline therapy. Patients of the control group received therapy according to the usual scheme, the main group – in addition to basic therapy (antipyretic and desensitizing drugs, local antiseptic agents for the treatment of the oral and nasopharyngeal) received cyclophyll intramuscularly at the rate of 10 mg/kg body weight per injection according to the scheme: 1, 2, 4, 6, 8, 11, 14, 17, 20, 23rd day. The efficacy of therapy was assessed by the periods of decrease in symptoms of intoxication, relief of clinical manifestations of the disease and normalization of laboratory data, including, in addition to the generally accepted studies, immunobiochemical indices (#-interferon, malonic dialdehyde) in the blood before and after treatment.
It is shown that the use of cycloferon as part of complex therapy contributes to faster reduction of the main clinical and hematological symptoms of the disease, the normalization of certain parameters of the immune system, the reduction of the expression of endogenous intoxication, and, as a result, the reduction in the length of stay of patients in the hospital. In none of the cases of using the drug cycloferon, no adverse reactions have been reported. Keywords: Epstein-Barr virus mononucleosis; reactivation of infection; children; cycloferon.

Комментарии