Факторы персистенции микрофлоры при воспалительных заболеваниях внутренних женских половых органов
СтатьиОпубликовано в:
Вестник Российской Ассоциации Акушеров-Гинекологов »» № 3 '98
Изучены видовой состав и биологические свойства микрофлоры влагалища и цервикального канала у 28 женщин с воспалительными заболеваниями внутренних половых органов (основная группа) и у 36 здоровых женщин (группа сравнения). Изучение микробиоценоза указанных биотопов показало, что воспалительные заболевания внутренних половых органов протекают на фоне дисбиотических состояний, характеризующихся выделением микроорганизмов с высокими персистентными свойствами. Последние, очевидно, играют большую роль в патогенезе воспалительных заболеваний и дисбиотических состояний внутренних гениталий женщины.
О.В. Бухарин, О.Д. Константинова, С.В. Черкасов, Е.А. Кремлева
Кафедра акушерства и гинекологии
(зав. кафедрой - доц,. Б.Н. Антоненко)
Оренбургской медицинской академии.
Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза Уральского отделения РАН, Оренбург.
В последнее время исследователи отмечают увеличение процента стертых и первично хронических форм воспалительных заболеваний внутренних женских половых органов [6]. Воспалительные заболевания полового тракта ведут к нарушению овариально-менструального цикла, снижению фертильности, повышению частоты невынашивания беременности, являются этиологическим фактором анте- и интранатального инфицирования плода [5]. Нередко развитие воспалительных заболеваний внутренних половых органов женщин происходит на фоне нарушений баланса микрофлоры влагалища и цервикального канала, являясь следствием дисбаланса защитных сил организма и патогенного потенциала бактерий [9, 10, 12], отражением крайней степени дисбиоза. Развитие и исход заболеваний микробной этиологии зависят от персистентных свойств микроорганизмов, направленных на инактивацию факторов естественной резистентности организма человека (лизоцим, комплемент и др.) [3]. Ранее было показано, что характер течения эндометритов и сальпингоофоритов зависит от выраженности факторов персистенции возбудителя [8]. Однако до настоящего времени не были исследованы маркеры персистенции патогенной микрофлоры влагалища и цервикального канала женщин, что позволило бы понять роль качественных изменений в микробиоценозе нижнего отдела внутренних половых органов при дисбиотических состояниях и воспалительных заболеваниях.
Целью настоящей работы явилось изучение видового состава и комплекса биологических свойств микрофлоры влагалища и цервикального канала при воспалительных процессах внутренних половых органов. Обследованы 64 женщины в возрасте от 18 до 49 лет. Основную группу составили 28 женщин, обратившихся в женскую консультацию по поводу различных воспалительных заболеваний внутренних половых органов. Группа сравнения представлена 36 женщинами, на момент обследования не предъявлявшими жалоб и не имевшими в течение года воспалительных заболеваний мочеполовой системы.
Для определения видового состава и биологических свойств микрофлоры производили взятие материала из заднего свода влагалища и аспирацию слизи цервикального канала. Посев производили на желточно-солевой агар, кровяной агар, среду Эндо и среду MRS по методике Ю.М. Фельдман и соавт. [11]. Видовой состав определяли с помощью коммерческих тест-систем фирмы "Лахема" (Чехия) и определителя бактерий Берджи. Персистентные свойства микроорганизмов - антилизоцимную активность (АЛА) - определяли у стафилококков, коринебактерий и энтеробактерий по методу "отсроченного антагонизма" [1], у стрептококков и энтерококков, учитывая их культуральные особенности, фотометрическим методом [4], антикомплементарную активность (АКА) определяли методом парциального гемолиза в геле [2]. Состояние микробиоценоза влагалища и цервикального канала характеризовали с использованием критериев, предложенных К.Я. Соколовой и соавт. [10]. Средний возраст женщин в основной и группе сравнения составил 30,2 и 30,6 года, количество родов на одну женщину 0,94 и 1,4 соответственно. Количество абортов в группе сравнения почти вдвое больше, чем в основной. Только в основной группе отмечались внематочная беременность в 13,3% случаев, первичное и вторичное бесплодие в 26,7% случаев. Выявленные различия позволяют нам судить о снижении фертильности в основной группе.
Интересным, на наш взгляд, является тот факт, что число женщин, использовавших внутриматочную контрацепцию (ВМС), в группах достоверно раэличалось: 26,7% - в основной, 6,3% - в группе сравнения (р<0,001).
Представленные данные подтверждают исследования других авторов [7], рассматривающих ВМС как фактор риска развития воспалительных заболеваний внутренних половых органов.
Наличие воспалительных заболеваний внутренних половых органов в анамнезе выявлено в основной группе в 66,7% случаев, в группе сравнения - в 12,5%, однако воспалительные заболевания влагалища и цервикального канала в анамнезе встречались с одинаковой частотой. Яркая классическая картина острого сальпингоофорита и эндометрита наблюдалась нами в 20% случаев. Температурная реакция была выражена лишь в 33% случаев, чаще в виде субфебрилитета. Нарушение менструальной функции имело место почти у половины пациенток.
В группе здоровых женщин чистота влагалищных мазков соответствовала I-II степени, в основной группе преобладала III степень чистоты. У 6,6% женщин выявлен трихомоноз, в 14,7% случаев - урогенитальный кандидоз. При изучении микрофлоры лактобактерии были выделены из вагинального секрета у 88,89% здоровых женщин и у 71,43% больных, а из цервикального канала соответственно у 44,44 и 21,43% (р<0,05) женщин. Определение видового состава вагинальной микрофлоры у женщин группы сравнения (здоровые) показало, что стафилококки составляли 34,48%, меньший процент занимали лактобациллы (27,6%), коринебактерии, энтерококки и энтеробактерии составили по 10,34%, стрептококки - 6,9% (табл. 1). В микрофлоре цервикального канала здоровых женщин также преобладали стафилококки (38,9%), лактобациллы (22,22%), стрептококки и энтерококки (по 11,1%), коринебактерии (16,7%). Энтеробактерии в цервикальном канале не были обнаружены.
Табл. 1. Микрофлора влагалища и цервикального канала у здоровых женщин и больных
| Микрофлора | Влагалище | Цервикальный канал | ||
| Здоровые | Больные | Здоровые | Больные | |
| лактобациллы | 22,2% | 16,7% | 22,2% | 14,3% |
| коринебактерии | 10,3% | 10% | 16,7% | 14,3% |
| стрептококки | 6,9% | 15% | 11,1% | 15,9% |
| энтерококки | 10,3% | 11,6% | 11,1% | 26,9% |
| стафилококки | 34,5% | 40% | 38,9% | 28,6% |
| энтеробактерии | 10,3% | 6,7% | 0% | 0% |
В вагинальной микрофлоре женщин основной группы было отмечено увеличение удельного содержания стафилококков (40%) и стрептококков (15%), уменьшение лактобацилл (16,7%) и энтеробактерий (6,7%), а содержание коринебактерий (10%) и энтерококков (11,6%) существенно не изменилось. Видовой состав микробиоценоза цервикального канала больных женщин по сравнению со здоровыми характеризовался увеличением доли стрептококков (15%) и энтерококков (26,9%), и снижением удельного веса лактобацилл (14,3%), коринебактерии (14,3%) и стафилококков (28,6%).
Анализ данных показателя обсемененности микроорганизмами эпитопов влагалища и цервикального канала женщины выявил существенное (р<0,05) снижение обсемененности лактобациллами влагалища и цервикального канала у больных женщин по сравнению со здоровыми. При этом значимых изменений обсемененности другими видами микроорганизмов указанных экониш отмечено не было (табл. 2). При оценке выраженности дисбиотических явлений во влагалище с учетом показателя обсемененности лактобациллами было установлено, что дисбиоз I степени наблюдался у 50% женщин основной группы, II степени - у 27% и III степени - у 23% пациенток.
Таблица 2. Обсемененность микроорганизмами влагалища и цервикального канала у здоровых и больных женщин
| Микроорганизмы, КОЕ/мл | Здоровые | Больные | ||
| влагалище | цервикальный канал | влагалище | цервикальный канал | |
| Лактобациллы | 5,34+/-0,08 | 4,75+/-0,12 | 3,33+/-0,23* | 3,1+/-0,12* |
| Стафилококки | 3,94+/-0,2 | 3,57+/-0,86 | 3,18+/-0,17 | 4,4+/-0,15 |
| Стрептококки | 5,0+/-0,4 | 5,2+/-0,62 | 4,42+/-0,44 | 5,8+/-0,31 |
| Энтерококки | 3,67+/-0,3 | 4,0+0,27 | 5,4+/-0,28 | 4,33+/-0,18 |
| Энтеробактерии | 3,57+/-0,49 | - | 3,1+/-0,39 | - |
| Коринебактерии | 3,0+/-0,13 | 3,3+/-0,15 | 2,5+/-0,13 | 3,2+/-0,12 |
Определение персистентных свойств микрофлоры влагалища и цервикального канала у здоровых женщин выявило невысокие значения антилизоцимной активности и антикомплементарной активности, тогда как у женщин с воспалительными заболеваниями внутренних половых органов изучаемые показатели были достоверно выше (табл. 3-5).
Таблица 3. Антилизоцимная активность (АЛА) микрофлоры влагалища и цервикального канала (метод "отсроченного антагонизма") у здоровых и больных женщин
| Микроорганизмы | АЛА, мкг/мл | |||
| влагалище |
цервикальный канал | |||
| здоровые | больные | здоровые | больные | |
| Коринебактерии | 1,33+/-0,26 | 2,5+/-0,4* | 1,0+/-0,26 | 2,4+/-0,22* |
| Стафилококки | 0,86+0,16 | 2,87+/-0,19* | 1,8+/-0,21 | 3,2+/-0,28* |
| Энтеробактерии | 2,0+0,23 | 4,6+/-0,7* | - | - |
Таблица 4. Антилизоцимная активность (АЛА) микрофлоры влагалища и цервикального канала (фотометрический метод) у здоровых и больных женщин
| Микроорганизмы | АЛА, мкг/мл | |||
| влагалище |
цервикальный канал | |||
| здоровые | больные | здоровые | больные | |
| Стрептококки | 0,151+/-0,05 | 0,346+/-0,07* | 0,162+0,06 | 0,354+/-0,07* |
| Энтерококки | 0,22+/-0 02 | 0,445+/-0,05* | 0,325+/-0,04 | 0,469+/-0,06* |
Таблица 5. Антикомплементарная активность (АКА) микрофлоры влагалища и цервикального канала у здоровых и больных женщин
| Микроорганизмы | АЛА, мкг/мл | |||
| влагалище |
цервикальный канал | |||
| здоровые | больные | здоровые | больные | |
| Коринебактерии | 2,62+/-0,97 | 6,6+/-1,5* | 2,4+/-1,2 | 7,9+/-1,2* |
| Стафилококки | 2,7+/-1,1 | 8,6+/-1,2* | 1,8+/-0,8 | 7,6+/-1,1* |
| Энтеробактерии | 3,7+/-1,3 | 6,8+/-0,7* | - | - |
| Стрептококки | 2,1+/-0,4 | 4,4+/-1,0* | 2,7+0,6 | 4,7+/-0,8* |
| Энтерококки | 2,6+/-0,8 | 5,4+/-1,1* | 3,4+/-0,6 | 8,4+/-1,2* |
Из представленных результатов видно, что у обследованных женщин наблюдались микроэкологические нарушения, которые характеризовались снижением обсемененности лактобациллами влагалища, однако каких-либо значимых изменений показателя микробной обсемененности биотопов влагалища и цервикального канала зарегистрировано не было, а ассоциации различных видов бактерий встречались и в группе здоровых женщин. Выявленные нами изменения в микробиоценозе влагалища и цервикального канала не укладываются в рамки существующей классификации, критерием которой являются дефицит лактофлоры, наличие ассоциаций и/или возрастание количественного уровня различных видов условно-патогенных микроорганизмов [10].
Приведенные данные показывают, что использование только количественных характеристик не является достаточным и диктует необходимость применения других критериев для описания микроэкологического статуса репродуктивной системы женщины.
Изучение микрофлоры влагалища и цервикального канала выявило, что воспалительные заболевания внутренних гениталий протекают на фоне дисбиотических состояний, характеризующихся выделением микроорганизмов с выраженными персистентными свойствами. Указанные микроэкологические нарушения в исследуемых биотопах возникают в результате изменения баланса в системе паразит-хозяин, следствием которого является селекция штаммов с персистентным патенциалом [3]. Таким образом, представленные результаты о наличии в микробиоценозе влагалища и цервикального канала персистирующей микрофлоры свидетельствуют о патогенетической роли последней при воспалительных заболеваниях и дисбиотических состояниях влагалища и цервикального канала женщин.
ЛИТЕРАТУРА
1. Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я., Малышкин А.П., Немцева Н.В.// Журн. микробиол. 1984. № 2. С. 27-28.
2. Бухарин О.В., Брудастов Ю.А., Дерябин Д.Г.// Клин. лаб. диагностика. 1992. № 11-12. С. 68-72.
3. Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я. Бактерионосительство. Екатеринбург, 1996. 206 с.
4. Бухарин О.В., Валышев А.В., Елагина Н.Н. и др.// Журн. микробиол. 1997. № 4. С. 117-120.
5. Голубев А.В. Ассоциации Enterobacteriaceae и Candida слизистых родовых путей женщин с нормальным течением беременности и с угрозой невынашивания: Автореф. дисс. ... канд. мед. наук. Иваново, 1993. 25 с.
6. Леденева Л.И. Диагностические критерии проведения общей бактериальной терапии у беременных с наличием очага инфекции: Автореф. дисс. ... канд. мед. наук. Барнаул, 1996. 27 с.
7. Максименко Т.А., Зенкина Н.П., Колкутина М.П. и др.// Вестн. Росс. ассоц. акуш.-гин. 1996. № 4. С. 61-62.
8. Первушина Л.А. Антилизоцимный признак микроорганизмов в бактериологической диагностике и лечении воспалительных заболеваний внутренних женских половых органов: Автореф. дисс. ... канд. мед. наук. Челябинск, 1990. 23 с.
9. Сидельникова В.М.., Слепцова С.И., Чаклин А.В.// Акуш. и гин. 1988. № 2. С. 3-5.
10. Соколова К.Я., Соловьева И.В., Попова Е.В. и др.// Аутофлора человека в норме и патологии и ее коррекция: Сб. науч. трудов/ Под ред. И.Н. Блохиной. Горький, 1988. С. 144-148.
11. Фельдман Ю.М., Маханева Л.Г., Шапиро А.В., Кузьменко В.Д.// Лаб. дело. 1984. № 10. С. 616-619.
12. Ovalle A., Martinez M.A., , Casala A.et al.// Rev.Chil. Obstet. Gynec. 1993. Vol. 58. № 2. P. 103-112.
