Воздействие гидролизата коллагена на метаболизм протеогликанов
СтатьиС. Оссер (научный сотрудник Кафедры обшей и торакальной хирургии Университета, г. Киль, Германия; Директор Научно-исследовательского института коллагена, Германия), М. Шунк (научный сотрудник НИИ коллагена, Германия)
Цель
В течение последних лет* гидролизат коллагена использовался для лечения остеоартритов (ОА), а положительный оздоровительный эффект от его использования был подтвержден доклиническими экспериментами и клиническими исследованиями.
Однако механизм воздействия до сих пор остается неизвестен. Целью настоящего исследования является изучение воздействия гидролизата коллагена (FORTIGEL®)** на метаболизм протеогликанов (ПГ) во внеклеточном матриксе хрящевых клеток.
*В странах Европейского Союза и США.
**В Российской Федерации FORTIGEL® представлен под торговой маркой СиЭйч-Альфа (CH-Alpha), производства компании «Саномед - Производство полезных продуктов питания для здоровья и спорта», Германия, под контролем «Гелита Хелс ГмбХ», Германия.
Методы и материалы
Основные хрящевые клетки суставов были выделены из суставных хрящей и культивированы в условиях пониженного кислорода. В питательную среду было добавлено 0,5 мг средства FORTIGEL® в соответствии с рекомендованной дозой для пациентов. На разных этапах культивирования, количество связанного с клетками протеогликанов было измерено с помощью определения включения 355-сульфата. Биосинтез протеогликанов был измерен с помощью особого окрашивания группы сульфатов альииановым синим. Более того, выделение аггрекана определялось с помощью нозерн-блоттинга, а количество аггрекана во внеклеточном матриксе анализировалось с помощью вестерн-блоттинга.
Результаты
Определение свойств средства FORTIGEL® показало среднюю молекулярную массу (MB), равную 3,3 килодальтона, с массой пептидов, варьирующейся от 0,5 до 15 килодальтонов (рис.1). Применение на питательной среде средства FORTIGEL® привело к значительному (р® по сравнению с контрольной группой клеток (рис.3). В особенности, применение средства FORTIGEL® было связано со значительным увеличением (рРис. 1. Выявление характеристик гидролизата коллагена (FORTIGEL®)
Выделение профиля FORTIGEL® из коллагена I типа. На рисунке изображена хроматограмма ВЭЖХ (средняя молекулярная масса 3,3 килодальтона)
Рис. 2. Значительное увеличение синтеза глюкозаминоглюканат после применения FORTIGEL®
Применение средства FORTIGEL® в течение трех дней привело к значительному увеличению синтеза глюкозаминоглюкана. n=20; *р
Рис. 3. Увеличенный синтез протеогликанов после применения FORTIGEL®
Синтез связанных с клетками протеогликанов в хряшевых клетках значительно увеличился после применения средства FORTIGEL®. Расшифровка представленной информации: n=11; *р
Рис. 4. FORTIGEL® стимулирует выделение и биосинтез аггрекана®.
Выделение РНК (а) и содержание аггрекана (b) значительно увеличились после применения средства FORTIGEL®. Расшифровка представленной информации: n=15; *р
Выводы
Результаты указывают на стимулирующий эффект средства FORTIGEL® на метаболизм протеогликанов в хрящевых клетках. Таким образом, FORTIGEL® может помочь сократить дегенеративные изменения внеклеточного матрикса с помощью стимуляции анаболических процессов в хрящевых тканях.
Эта информация подтверждена клиническими исследованиями (МакАлиндон и другие), которые продемонстрировали, что пероральное применение средства FORTIGEL® привело к увеличению содержания протеогликанов в гиалиновом хряще.
